Hybridomcelleutvidelse og subkloningsmedium 杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

产品信息 Produktbeskrivelse

产品名称

Produktnavn

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Hybridoma celleekspansjon og subkloningsmedium

货号 Kat.nr

BRS-MED02

规格

Spesifikasjon

500 ml/µg

500 ml/flaske

产品组分

Komponenter

DMEM基础培养基:80 %(体积比)

DMEM Base Medium: 80 % (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Fetalt bovint serum (FBS, importert): 10 % (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Betinget medium: 10 % (v/v)

青霉素:100 单位/ml

Penicillin: 100 U/ml

链霉素:100 单位/ml

Streptomycin: 100 U/ml

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Andre tilsetningsstoffer: Enkeltcelle-proliferasjonsfaktorer og småmolekylære kosttilskudd

保存条件

Lagringsforhold

-20 grader 保存, 有效期 18 个月.

Oppbevares ved -20 grader, holdbarhet 18 måneder

使用方法

Bruksanvisning

培养基融化:

37 grader 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置3-5min使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Tining av mediet:

Tin mediet i et 37 graders vannbad. Tørk av den ytre overflaten med 70 % etanol og plasser i et biosikkerhetsskap for bruk.
Merk: Utseendet til en liten mengde hvitt flokkulerende materiale etter tining er normalt. La mediet stå i 3–5 minutter for at flokkene skal sette seg, og samle deretter supernatanten for bruk.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0.8-1.5cell/孔/200ul培养基铺数后按.

Håndtering av fusjonsbrønner – sunne celler:

For fusjonsbrønner med celler i god tilstand (f.eks. medium farge normal eller svakt gul, celler under mikroskop virker sunne, lyse og normale i størrelse), pipetteres forsiktig opp og ned med en gul pipettespiss. Tell cellene og plate ved 0,8–1,5 celler/brønn i 200 µL medium.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Håndtering av fusjonsbrønner – suboptimale celler:

For fusjonsbrønner med celler i suboptimal tilstand (f.eks. medium surgjort/gule eller celler ser skrumpet ut, mørke under mikroskop), er to alternativer tilgjengelige for påfølgende subkloning:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml本培养基的24孔板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1,5 celler/孔/200ul培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

Alternativ 1: Overfør celler fra fusjonsbrønnen til en 24-brønns plate som inneholder 1 mL av dette mediet. Etter 2–3 dagers ekspansjon, tell cellene og utfør subkloning med 0,8–1,5 celler/brønn i 200 µL medium. På dette stadiet er celledobling begrenset, men celletilstanden er god, noe som gjør den ideell for subkloning.

第2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的本基兇兇兇养兇庻CO2静置培养3-4小时,然后取样细胞计数后进行亚克隆(0.8-1.5cell/孔/200ul培养基);

Fjern forsiktig supernatanten fra fusjonsbrønnen med en gul pipettespiss og tilsett 200 µL friskt medium per brønn. Inkuber ved 37 grader, 5 % CO₂ i 3–4 timer. Prøv deretter cellene, tell og utfør subkloning med 0,8–1,5 celler/brønn i 200 µL medium.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Merk: Subkloner dyrket med Hybridoma Cell Expansion og Subcloning Medium når vanligvis et stadium som er egnet for nedstrøms screening eller analyse på dagene 6–8 etter -subkloning.